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04/02/2026

Ralos industriais como reservatórios de Listeria monocytogenes: diversidade populacional e estratégias preventivas

Ralos industriais como reservatórios de Listeria monocytogenes: diversidade populacional e estratégias preventivas

  Listeria monocytogenes, um dos principais patógenos transmitidos por alimentos e agente etiológico da listeriose, apresenta ampla distribuição ambiental e pode contaminar alimentos prontos para consumo por meio de contaminação cruzada em ambientes de processamento. Nesse cenário, os ralos de drenagem são reconhecidos como importantes reservatórios de persistência desse microrganismo em ambientes industriais, especialmente em plantas de processamento de alimentos.

Tradicionalmente, a caracterização genética de L. monocytogenes para o rastreamento de fontes de contaminação baseia-se na análise de um único isolado obtido após o enriquecimento seletivo, abordagem que pode não refletir adequadamente a diversidade genética presente na amostra. Nesse contexto, o grupo de pesquisadores liderado por Fagerlund et al. (2025) conduziu um estudo com o objetivo de avaliar a detecção precoce, a diversidade genética e o comportamento populacional de L. monocytogenes em ralos naturalmente contaminados de uma planta de processamento de carne, bem como investigar a influência da microbiota residente. Para esse propósito, seis ralos foram amostrados repetidamente ao longo de oito semanas e submetidos a enriquecimento seletivo. Ao todo, 460 isolados foram analisados individualmente por um método de PCR em tempo real (qPCR) multiplex para a identificação e subtipagem de L.monocytogenes, permitindo a diferenciação de grupos geneticamente relacionados, com posterior seleção de isolados representativos para o sequenciamento do genoma completo (WGS). Paralelamente, a comunidade microbiana dos ralos foi caracterizada por sequenciamento do gene 16S rRNA, além do uso de abordagens metagenômicas e quasimetagenômicas. A Tabela 1 apresenta uma comparação entre essas metodologias, destacando suas principais vantagens e limitações.

 Tabela 1. Comparação conceitual entre abordagens analíticas utilizadas na detecção e caracterização de patógenos.

 

Abordagem

Material genético analisado

Vantagens

Limitações

Cultivo + isolado único

DNA de uma única colônia isolada

Simplicidade operacional e baixo custo

Perda da diversidade populacional presente na amostra

qPCR multiplex

Regiões gênicas específicas previamente definidas

Alta sensibilidade, especificidade e rapidez; detecção simultânea de múltiplos alvos

Informação restrita aos alvos selecionados; ausência de dados genômicos globais

WGS de isolados

Genoma completo de colônias isoladas

Alta resolução genômica para tipagem e estudos epidemiológicos

Dependente do isolamento e da seleção de colônias representativas

Metagenômica direta (shotgun)

DNA total da amostra sem enriquecimento

Representação abrangente do microbioma

Baixa sensibilidade para microrganismos de baixa abundância

Quasimetagenômica

DNA total após etapa de enriquecimento

Alta sensibilidade aliada à detecção de múltiplas linhagens

Viés introduzido pelo enriquecimento microbiológico

Segundo os pesquisadores (Fagerlund et al., 2025), L. monocytogenes foi detectada na maioria das amostras, frequentemente com a coexistência de múltiplas linhagens genéticas em um mesmo ralo, apresentando padrões de dominância distintos entre os diferentes pontos amostrados e baixa variação ao longo do tempo. A detecção recorrente das mesmas linhagens nos mesmos locais evidencia que o patógeno não ocorre de forma esporádica, mas permanece estabelecido no ambiente por períodos prolongados, mesmo diante das rotinas de limpeza e desinfecção, caracterizando persistência ambiental. Ralos com maior umidade apresentaram maior diversidade genética do patógeno e maior riqueza microbiana quando comparados a ralos secos, enquanto a detecção de linhagens minoritárias apenas após diferentes etapas de enriquecimento evidenciou que estratégias baseadas em um único isolado podem levar a interpretações equivocadas sobre persistência e rotas de contaminação.

Apesar de L. monocytogenes ter sido ocasionalmente detectada sem etapa prévia de enriquecimento, tanto por cultivo direto quanto por sequenciamento metagenômico shotgun, sua presença em níveis muito baixos impediu uma avaliação confiável da diversidade genética do patógeno. A microbiota residente dos ralos, dominada por gêneros como Pseudomonas, Acinetobacter, Janthinobacterium, Chryseobacterium, Staphylococcus e Sphingomonas, manteve-se relativamente estável ao longo do tempo e não apresentou associação consistente com a presença ou ausência de L. monocytogenes. Esses achados reforçam que os ralos funcionam como nichos ecológicos estáveis, capazes de sustentar múltiplas linhagens do patógeno por períodos prolongados, incluindo variantes adaptadas ao ambiente industrial e de relevância para a saúde pública.

Diante dessa persistência, torna-se evidente que a prevenção da contaminação não pode depender apenas de procedimentos operacionais, mas deve começar já na fase de concepção dos sistemas de engenharia. A aplicação de princípios de Design Higiênico aos sistemas de drenagem busca eliminar condições favoráveis à estagnação de água e à formação de biofilmes, reduzindo significativamente o risco de colonização por patógenos. Sistemas projetados segundo esses critérios apresentam superfícies contínuas, bordas arredondadas, ângulos internos adequados e declividades incorporadas (em torno de 1%), garantindo o escoamento eficiente de líquidos e minimizando pontos de retenção de água (ACO). Além de facilitar a limpeza e sanitização, essas características transformam o sistema de drenagem em um componente ativo no controle da segurança de alimentos (ACO HygieneFirst).

Para potencializar essa abordagem preventiva, é fundamental a adoção de um monitoramento ambiental rigoroso, iniciado por triagens (screening) e, quando necessário, complementado por análises moleculares, como o sequenciamento. Essa estratégia possibilita a detecção precoce de L. monocytogenes, a identificação de múltiplas linhagens e o mapeamento de nichos de persistência. Associada a sistemas de drenagem com desenho higiênico e a procedimentos eficazes de limpeza e sanitização, essa atuação integrada reduz riscos e assegura a vigilância contínua necessária à segurança dos alimentos em ambientes industriais.

Referências

ACO.  https://www.buildingdrainage.aco/

ACO. HygieneFirst. A filosofia representa o compromisso da ACO com o alto desempenho higiênico. A ACO aborda a importância crescente atribuída em matéria de higiene. https://www.hygienefirst.com/br

FAGERLUND, A., MØRETRØ, T., JENSEN, M. R., LANGSRUD, S., MOEN, B. (2025). Early detection and population dynamics of Listeria monocytogenes in naturally contaminated drains from a meat processing plant. Frontiers in Microbiology, 16, 1541481.

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