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    EXPRESSÃO DO GENE ESR1 EM TUMORES DE MAMA CANINO
    (2023-12-19) Götze, Daniela Markus; Contini, Veronica; Bustamante Filho, Ivan Cunha; http://lattes.cnpq.br/5447836974424243; Fernandes, Cristina Gewehr; Majolo, Fernanda; Luz, Marcelo Rezende
    O câncer é a causa mais comum de morte em cães em todo o mundo, sendo que os tumores mamários constituem a neoplasia mais frequente em fêmeas caninas. Esses tumores são caracterizados por uma apresentação clínica, comportamento biológico e características morfológicas e moleculares variáveis. Dentre os fatores envolvidos em sua patogênese está a exposição ao estrógeno e a ação de seu receptor. O receptor de estrógeno-α (REα) é uma proteína, codificada pelo gene ESR1, amplamente utilizada como marcador molecular de prognóstico para o câncer de mama em mulheres, porém na cadela ainda é pouco utilizado. Neste trabalho, foi avaliada a expressão do gene ESR1 por qPCR em amostras de mama normal, lesões epiteliais não neoplásicas, tumores mamários benignos e malignos. Além disso, fez-se acompanhamento desses animais por um período de 2 anos, avaliando a sobrevida global e a sobrevida livre de doença. Neste estudo foram utilizadas biópsias de 21 cadelas com tumores mamários. No estudo histopatológico foram identificadas 90 lesões, sendo 19 lesões epiteliais não neoplásicas, 2 tumores benignos e 69 tumores malignos. Foi encontrado um maior número de lesões em animais com mais idade (p<0,05). Animais castrados juntamente com a mastectomia apresentaram uma sobrevida maior do que animais inteiros (p<0,05). Observou-se uma menor expressão do gene ESR1 (p < 0,05) nos tumores malignos em relação às mamas normais, lesões epiteliais não neoplásicas e aos tumores benignos. Além disso, verificou-se uma maior expressão em carcinomas de bom prognóstico comparado aos carcinomas do tipo especial (p<0,05). Sendo assim, sugere-se a utilização do gene ESR1 como biomarcador de bom prognóstico em cadelas com lesões mamárias.
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    Screening de pequenas moléculas potenciais inibidoras da p38δ MAPK como estratégia para a busca de um novo tratamento para câncer de mama
    (2020-09) Anton, Débora Bublitz; Timmers, Luís Fernando Saraiva Macedo; Goettert, Márcia Inês; http://lattes.cnpq.br/5742493416858879; Bustamante Filho, Ivan Cunha; Ducati, Rodrigo Gay; Morrone, Fernanda Bueno
    O câncer de mama é a neoplasia mais frequente entre as mulheres e a principal causa de morte relacionada ao câncer nas mulheres do mundo todo. Os principais tratamentos para essa doença, como a quimioterapia, radioterapia e cirurgia, podem apresentar diversos efeitos colaterais e não serem eficazes em estágios avançados da doença quando existem altas chances de metástase. Pequenas moléculas que atuam em alvos específicos de vias de sinalização que podem estar desreguladas no câncer como, por exemplo, a via p38 MAPK, estão sendo estudadas para a terapêutica antineoplásica e são alvos promissores para o desenvolvimento de novos fármacos mais seletivos. Visto que no câncer de mama o aumento da expressão da isoforma p38δ está relacionado com progressão do tumor e metástases, e visando a carência de inibidores específicos de p38δ, este estudo teve como primeiro objetivo identificar, por meio de um screening virtual, pequenas moléculas com potencial de inibir p38δ. Posteriormente, o objetivo foi avaliar o potencial antitumoral da molécula selecionada na linhagem de adenocarcinoma de mama humano MCF-7. As estruturas 3D da p38δ na sua forma ativa (DFG-in) e inativa (DFG-out) foram selecionadas do banco de dados PDB. Candidatos a ligantes foram selecionados após revisão na literatura e suas estruturas foram obtidas do banco de dados PubChem. O screening virtual indicou a Hipericina como a molécula de maior afinidade pela p38δ ativa, sendo assim, um candidato a inibidor da enzima p38δ. A viabilidade e proliferação de células MCF-7 foram determinadas após diferentes tratamentos com Hipericina por 24, 48 e 72 horas, através do ensaio de MTT e clonogênico, respectivamente. Entretanto, nesses ensaios a Hipericina não demonstrou ter atividade antitumoral na MCF-7. Visto que a Hipericina não apresentou a citotoxicidade esperada, a molécula PIT97 foi escolhida para ser estudada quanto ao seu potencial antitumoral in vitro e como uma possível molécula candidata ao tratamento do câncer de mama. As linhagens MCF-7 e de macrófagos murino RAW 264.7 foram tratadas com diferentes concentrações do PIT97 e a viabilidade celular foi avaliada após 48 e 72 horas, através do ensaio de MTT. A proliferação de células MCF-7 tratadas com PIT97 por 72 horas foi avaliada pelo ensaio clonogênico. Os resultados obtidos demonstraram redução da viabilidade da MCF-7 após o tratamento com o PIT97 por 48 e 72 horas, enquanto que na linhagem RAW 264.7 baixas concentrações da molécula (0,1 μM e 0,01 μM) não foram tóxicas. Além disso, foi demonstrado que o PIT97 não só atua a curto prazo na linhagem MCF-7, mas continua tendo efeitos citotóxicos a longo prazo. Desta forma, a molécula PIT97 possui potencial como molécula candidata e como alternativa terapêutica mais seletiva para o câncer de mama. Consequentemente, estudos serão realizados visando elucidar e compreender o mecanismo pelo qual a molécula exerce seu efeito.
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    Identificação e caracterização de microrganismos visando maior eficiência na produção de biogás
    (2020-02) Marder, Munique; Konrad, Odorico; Granada, Camille Eichelberger; http://lattes.cnpq.br/1836592557536308; Heidrich, Daiane; Bucker, Francielle; Colla, Luciane Maria
    Os setores agrícolas e agroindustriais geram resíduos ricos em matéria orgânica, principalmente os dejetos animais. Estes, por sua vez, podem ser degradados por processos biológicos e aproveitados como biomassas na geração de bioenergia em sistemas de digestão anaeróbia. O uso de co-digestão pode otimizar a produção de biogás e metano e, ao final do processo, sevir como inoculante na iniciação dos processos de digestão anaeróbia. Neste sentido, o objetivo deste estudo foi desenvolver, caracterizar e avaliar a eficiência de inoculantes, utilizando co-digestão anaeróbica de diferentes resíduos do agronegócio como biomassa em temperatura controlada e ambiente, e formular um inoculante com uma mistura de microrganismos isolados visando otimizar a produção de biogás e metano. Para isto, foram preparados quatro inoculantes (constituídos de dejeto suíno, aves e bovino), que foram incubados anaerobicamente por 72 dias e aclimatados em temperatura controlada (35o C) e ambiente (28 ± 3,5° C). Um inoculante, em cada temperatura, foi alimentado com uma mistura de celulose microcristalina, gelatina, latose e resíduo de óleo de cozinha. Ao final, a identificação da comunidade microbiana mostrou que os inoculantes apresentaram diferenças importantes entre as duas temperaturas avaliadas, Bacteroidetes foi o filo mais representativo em inoculantes a 28° C e Firmicutes a 35° C, e destaca-se que o uso dos inoculantes (alimentado e não alimentado) melhora o rendimento da produção de biogás e metano 28 °C, atingindo valores semelhantes na faixa ideal de temperatura (35° C). O isolamento de 10 microrganismos anaeróbicos facultativos dos inoculantes mostrou que eles pertencem ao filo Firmicutes, famílias Paenibacillaceae e Bacillaceae. A adição desta mistura de microrganismos não melhorou a produção de biogás nas diferentes temperaturas, no entanto, mais testes serão necessários para avaliar o potencial destes microrganismos. A partir dos resultados obtidos pode-se concluir que o uso de inoculantes em sistemas de digestão anaeróbica melhora a eficiência da produção de biogás e metano em temperaturas inferiores (28 °C ±3,5) a considerada ideal (35 oC), o que pode permitir o uso desse tipo de produção de energia nas regiões que apresentam temperaturas ligeiramente mais baixas.
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    Características físico-químicas de farinhas infestadas por ácaros
    (2018-01) Vogel, Patrícia; Hoehne, Lucélia; Ferla, Noeli Juarez; http://lattes.cnpq.br/6071378790176893
    Changes on the physicochemical characteristics of wheat, maize and oat flour infested by Tyrophagus putrescentiae (T. putrescentiae) were evaluated for a period of nine months of storage. The moisture increased, but there was no statistical difference. 30 The organic components, protein and lipids, decreased during storage, while ashes and minerals increased. We observed statistical differences during the period in the same samples. However, there was no statistical difference in samples with and without mites. Therefore, small amounts of T. putrescentiae, as assessed in the present study, were not able to change physicochemical characteristics in wheat, maize and oat flour.
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    Estudo do Comportamento de Tetranychus urticae e Tetranychus ludeni sobre cultivares de soja RR e IPRO
    (2017-06) Galvan, Danielle; Ferla, Noeli Juarez; http://lattes.cnpq.br/6071378790176893; Freitas, Elisete Maria De; Johann, Liana; Ferla, Noeli Juarez
    A cultura da soja tem grande importância para o agronegócio. Durante seu ciclo sofre danos ocasionados por diversas pragas. O objetivo deste trabalho foi avaliar o comportamento de Tetranychus urticae Koch e Tetranychus ludeni Zacher em genótipos de soja RR e IPRO, através da avaliação da distribuição espacial destes sobre as plantas e a influência da presença de tricomas, atratividade e preferência de oviposição e preferência às cultivares quando pré-infestadas com uma das espécies. Para tanto, os testes foram realizados no Laboratório de Acarologia da Universidade do Vale do Taquari - Univates, com folhas obtidas de plantas mantidas em casa de vegetação. Os testes foram realizados sobre as cultivares TMG7262RR, NIDERA5959IPRO, SYN13561IPRO, SYN1257RR e CONVENCIONAL. Para distribuição espacial e densidade de tricomas, foram conduzidos ensaios sobre plantas “in vivo” com liberação de indivíduos nos terços medianos das cultivares. Após 72 horas realizou-se a contagem dos indivíduos e oviposição sobre os terços das plantas, e para tricomas o ensaio foi realizado através da amostragem de folhas das cultivares e contagem de tricomas. Quanto ao teste de atratividade e preferência para oviposição e preferência às cultivares quando pré-infestadas com uma das espécies, foram utilizadas bandejas forradas com esponja de 3 cm de espessura umedecidas e cobertas com uma placa de vidro e uma folha de encadernação, em que as folhas de soja eram dispostas em forma de polígonos em cujo centro foram liberados 50 indivíduos das espécies em estudo, sendo que no segundo teste foram feitas duas sequências de liberação. As avaliações foram feitas a partir da contagem de indivíduos e oviposição sobre as folhas para o primeiro ensaio e contagem dos indivíduos no segundo. O delineamento experimental foi de blocos inteiramente casualizados, com 10 repetições por cultivar. Com relação à distribuição espacial, a maior população de ambas as espécies ocorreu nos terços apicais das cultivares CONVENCIONAL e TMG7262RR para Tetranychus urticae e Tetranychus ludeni, respectivamente. Os terços basais foram pouco colonizados, havendo oviposição mais significativa sobre a cultivar NIDERA5959IPRO. Os tricomas não apresentaram influência na preferência. A preferência das espécies acarinas variou entre os genótipos, sendo a cultivar NIDERA5959IPRO a de maior atratividade e preferência para oviposição das duas espécies. Nas diferentes sequências de liberação, as espécies apresentaram maiores populações na cultivar CONVENCIONAL e SYN1257RR para LU e UL, respectivamente. Na sequência LU, T. ludeni apresentou maiores populações em NIDERA5959IPRO e SYN1257RR em relação à T. urticae.