Detalhes do Projeto de Pesquisa

Ferramentas para auxílio diagnóstico e terapêutico de doenças infecciosas


Coordenação: Daiane Heidrich

Pesquisadores:

Claudia Couto De Barros Coelho


Bolsistas:

Cassiano Lopes de Castro


Órgãos Financiadores:

Universidade do Vale do Taquari - Univates


Resumo:
A identificação clínica de bactérias e fungos, em muitas vezes, é dispendiosa ou não é capaz de identificar o microrganismo em nível de espécie. Além disso, a falta de ensaios de suscetibilidade a antimicrobianos utilizados na prática clínica ou o tempo necessário para obtenção desses resultados estimulam a resistência a antimicrobianos, além de aumento na geração de custos de internação, medicamentos e exames complementares. Assim, há busca de tecnologias limpas em medicina laboratorial que aliem redução de geração de custos e resíduos com robustez, rapidez e sustentabilidade de implementação, como a Espectroscopia no Infravermelho com Transformada de Fourier (FT-IR), que tem se tornado uma ferramenta de grande utilidade para fins diagnósticos na área da saúde através da promoção de modelos FT-IR utilizando como referência (supervisionados) por métodos clássicos ou padrões-ouro de análise. Na área de infectologia humana, a utilização de modelagem FT-IR para identificação e caracterização de isolados clínicos a partir de culturas de bactérias e fungos está documentada. No entanto, observa-se a utilização de baixo número de isolados para análise FT-IR propostas ou os estudos não utilizaram como referência o padrão-ouro de identificação dos microrganismos (sequenciamento do DNA). Desta forma, o objetivo deste projeto é desenvolver modelos por FT-IR para auxílio diagnóstico e terapêutico de doenças infecciosas. Inicialmente, serão realizadas modelagens FT-IR para identificação e perfil de suscetibilidade a dois antifúngicos utilizados na prática clínica das infecções ungueais e cutâneas causadas por espécies dermatófito Trichophyton e da levedura Candida, devido à alta prevalência destes gêneros relacionados a micoses cutâneas descrita na população mundial. Para obtenção das seis modelagens (duas de identificação e quatro de suscetibilidade), 50 isolados de Trichophyton e 50 de Candida, compostos por, no mínimo, 10 isolados de cada espécie, provenientes de pele e unha serão: identificados pelo sequenciamento da região ITS1-5.8S rDNA-ITS2; submetidos e determinação da concentração inibitória mínima (CIM) dos antifúngicos fluconazol, no caso de isolados de Candida, terbinafina, no caso de isolados de Trichophyton e itraconazol, em isolados de ambos os gêneros; e preparados para aquisição de espectros e análise FT-IR. Após a obtenção dos modelos, em uma única aplicação fúngica destes gêneros no equipamento FT-IR, serão obtidos resultados de identificação em nível de espécie e suscetibilidade em poucos minutos de avaliação espectral. Além da maior
rapidez, a utilização da ferramenta FT-IR gera menor custo e menor impacto ambiental com a mesma robustez, sensibilidade e especificidade da identificação molecular e ensaio antifúngico. Este projeto se constitui num primeiro passo para simplificação de diagnóstico laboratorial de microrganismos patogênicos, auxiliando na implementação de modelagem FT-IR como ferramenta em laboratórios clínicos.